揭秘广东省第二人民医院P3实验室 新冠病毒是这样被“揪出来”的_南方网

揭秘广东省第二人民医院P3实验室 新冠病毒是这样被“揪出来”的_南方网
大洋网讯 “这儿是与病毒‘零距离’触摸的当地,整个试验室彻底密封,室内处于负压状况,咱们喜爱用‘三流’来描述它,即人流、物流、气流的单向活动,确保在里面的污染物不会走漏到外面而形成污染。”广东省第二人民医院P3试验室主任林剑国说,而“这儿”指的便是P3试验室。  广东省第二人民医院每天400多份新冠肺炎核酸检测便是在这儿展开的。一起来揭开省二医P3试验室的奥秘面纱,看看新式冠状病毒究竟是怎样被“揪出来”的。作业人员在进行开盖加样和核酸提取。  核酸检测是确诊新冠肺炎的“金规范”,而检测流程中的每一个环节都是精细活,容不得半点大意。  在操作中,试验员面临眼前的样本,需求“一个一个地揭开盖子,开盖加样和核酸提取”,这无疑是与“病毒”正面交锋,林剑国指出,试验室内的检测流程可分为5个进程:样本进入“传递窗”-灭活处理-开盖加样和核酸提取-扩增反响判别成果-高压灭菌。  1.样本进入试验室。收集的检测样本如咽拭子或肛拭子,在进入P3试验室前就得先进入一个特别的窗口——“传递窗”,这个窗口也叫做Air Lock(空气锁)。这个传递窗有不能一起翻开的两层门,确保传递样本时带进去的空气被隔绝在两层门中,确保试验室外的环境不受污染。  2.检测前的灭活处理。样本在水浴箱经半个小时56℃高温灭活,这样会使病毒蛋白不再有生理活性,失掉感染、致病和繁衍才干,在对样本进行检测时相对安全,可是病毒蛋白的基因序列并没有受到影响。  3.进行开盖加样和核酸提取。广东省第二人民医院查验医学部副主任技师胡亮杉是进入P3负压试验室完结设备调试、程序设定、试剂试用等前期准备作业的第一人。  据她介绍,在标本处理间,试验员拿到灭活后的样本时,第一个动作便是振动,尽量让拭子上的病毒洗脱在培养基溶液中,再静置五分钟进行沉积。接下来便是开盖加样,有必要人手操作,并且需求两个人高度合作才干完结,一人拧开样本罐盖子,另一人拿着微量移液器在样本罐中汲取微量溶液,放到另一个提取管里,一个样本对应一个提取管,再拧上管盖。  就这样,400多份样本要翻开瓶盖汲取搬运400屡次,每一次都是试验员与病毒面临面的“开撕”。  “样本在开盖搬运的进程中,病毒就十分简单暴露在试验室的空气中,近在咫尺,与咱们简直便是零距离触摸了。”胡亮杉说,“开盖加样的时分,拿着微量移液器的手往往由于戴着两层手套,而显得有些蠢笨,可又不得不小心慎重,再加上眼罩、面屏和生物安全柜玻璃窗的三重隔绝,一切动作都显得缓慢,手也由于劳累而不时哆嗦,经常是左手扶着右手完结加样的。”  人工核酸提取的进程更是杂乱,检测的是试验员的耐性与慎重。  “核酸提取能够运用仪器辅佐,但由于比对的需求,往往要加以人工操作,这需求重复进行离心、加试剂、洗刷等10多个进程,其间需求翻开管盖的操作就达7次以上,完结一例人工核酸提取要50分钟左右。”胡亮杉说。  4.扩增反响——45个循环制作荧光曲线判别成果。提取的核酸送到核酸检测室内,就要上仪器了。提取的核酸加入到扩增试剂中,通过荧光PCR仪进行RT-PCR反响,先将提取的核酸反转录成DNA,再以DNA为模版,对特定位点进行扩增,使用不同的温度进行变性、退火和延伸,每个循环收集荧光值,45个循环后制作荧光曲线,用时约110分钟,试验员依据荧光曲线剖析判别成果的阴性和阳性。  5.污染物的高压灭菌处理。试验进程发生的污物通过高压灭菌后,按相关一般医疗垃圾处理。“物流”的结尾在这儿就结束了。  怎样避免呈现“假阳性”“假阴性”?  在P3试验室,任何一个环节都不能忽视,任何一个环节呈现问题都或许导致“假阴性”或“假阳性”。  检测质量的保证办法在试验室前就开端了——样本收集人员须经严厉训练查核才干上岗,每个动作流程须按规则进行,样本护卫须由专人专道配送到试验室。对可疑样本,选用不同的试剂进行复核确认,以避免“假阴性”;每一批试验,均会随机刺进三个以上空白对照,针对阳性样本会进行病毒基因的测序比对,以避免“假阳性”;检测后,定时随机抽取检测后的样本送第三方试验室进行检测,对数据进行比照剖析。  在P3试验室作业是怎么样的?  病毒核酸检测,安满是重中之重,尤其是作业人员的安全,中级防护服穿脱进程一个都不能少。  首先在清洁区内穿戴中级防护服-通过缓冲间进入到试验室内负压作业间,在这儿进行标本处理,核酸提取及检测-结束后进行空间、外表消毒,按次序脱下防护服-通过淋浴间更衣后,回到清洁区。  广东省第二人民医院P3试验室现在有21人,实施一天三班制。在疫情十分时期,为了满意检测需求,缩短检测时刻,在原有团队基础上,从风湿免疫科、血液科等科室试验室分配添加人员。“侦察兵”的检测团队70%以上是硕士以上学历,均通过分子生物学的训练和具有PCR上岗证。  依照“新式冠状病毒肺炎治疗计划”及生物安全要求,检测人员需在P3试验室负压密闭的空间里穿戴三级防护配备,在5个小时内不吃不喝,乃至要穿戴成人纸尿裤以处理上厕所的需求,还要随时战胜因负压差及紧密配备导致的头晕、吐逆等症状。  不仅如此,检测人员还要战胜心理上的惊骇。咽拭子样本是从疑似患者鼻咽部收集,或许含有较多新冠病毒,检测人员从采样罐里拿出样本时,病毒在这样密闭的环境中很简单凭借空气传达。  “他们与战役在病房里的医护人员不同,他们在试验室里,每天与病毒近距离触摸,是他人看不见的‘最前哨’。”广东省第二人民医院P3试验室主任林剑国说。  文、图/广州日报全媒体记者何雪华 通讯员陈淑华

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